|                                                           |
|ХЛАМИДИОЗ - СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИЮ    |
|Цитоскопические методы обнаружения хламидий                |
|При цитоскопическом методе одновременно с поиском          |
|цитоплазматических клеток-включений Провачека учитывается  |
|количество лейкоцитов как показателя воспаления, а также   |
|дополнительная информация о наличии сопутствующей          |
|бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных грибов, трихомонад|
|и т.п.                                                     |
|Показания: Острая фаза заболевания.                        |
|Материалом для исследования служат соскобы из уретры у     |
|мужчин и уретры и /или цервикального канала у женщин.      |
|Материал берут специальными щеточками или ложечками        |
|Фолькмана. Выделения из цервикального канала удаляются     |
|ватным тампоном. Щеточка вводится в канал на 1-2 см,       |
|вращается 15 секунд . Соскобный материал распределяется на |
|предметном стекле, высушивается на воздухе и фиксируется в |
|метаноле или холодном ацетоне. Наиболее популярна окраска  |
|по Романовскому-Гимзе. После окраски препараты             |
|просматриваются в световом микроскопе, используя           |
|иммерсионный объектив (х90). При этом цитоплазма клеток    |
|окрашивается в голубой цвет, ядра в фиолетово-синий,       |
|цитоплазматические включения определяются в виде           |
|темно-синих или розовых микроколоний на фоне голубой       |
|цитоплазмы. На стадии элементарных включения хламидий      |
|окрашиваются в розовый цвет, на стадии элементарных телец  |
|-в синий.                                                  |
|Цитоскопический метод широко доступен, но эффективен лишь  |
|при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и |
|информативен при хронических формах заболевания При        |
|урогенитальном хламидиозе частота обнаружения телец        |
|Провачека в соскобах уретры и цервикального канала не      |
|превышает 10-12 %. Наличие этих телец подтверждает диагноз |
|хламидиоза, однако их отсутствие не исключает наличие      |
|инфекции.                                                  |
|                                                           |
|                                                           |
|Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ)                           |
|Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов      |
|хламидий. При люминесцентной микроскопии включения хламидий|
|определяются в виде зеленой или желто-зеленой флюоресценции|
|включений на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток    |
|Включения могут иметь зернистую гомогенную или смешанную   |
|структуру.                                                 |
|Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим      |
|методом являются:                                          |
|1.Острая фаза заболевания.                                 |
|2.Хроническая фаза заболевания                             |
|3 Установление этиологии хронического инфекционного        |
|процесса урогенитального тракта                            |
|4. Беременность с отягощенным акушерским анамнезом         |
|5. Бесплодие неясного генеза.                              |
|Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее|
|помощью выявляются не только корпускулярные, но и          |
|растворимые антигены хламидий Этот метод не зависит от     |
|возможного изменения тинкториальных свойств микроорганизма |
|в процессе заболевания и лечения. ПИФ-метод является       |
|важнейшим скриннинговым методом диагностики урогенитального|
|хламидиоза. Его чувствительность и специфичность при       |
|использовании моноклональных антител составляет            |
|соответственно 65-90% и 85-90%. При оценке результатов     |
|следует учитывать, что только показатели внутриклеточной   |
|флюоресценции могут оцениваться в качестве положительного  |
|результата этого теста при использовании поликлональных    |
|антихламидийных антител, при использовании моноклональных -|
|результат считают при наличии 10 ЭТ в поле зрения.         |
|Соскобные препараты готовят также, как и для               |
|цитоскопических исследований.                              |
|Выпускают диагностические наборы, содержащие моноклональные|
|антитела для ПИФ, следующие фирмы: Syva, Drfco, Kallastad, |
|Bartrels, Boots celltech, California Integrated            |
|Diagnostics, Orion Diagnostica. Реагенты фирм Syva, Difco, |
|Kallastad представляют собой меченные ФИТЦ моноклональные  |
|антитела к основному белку наружной мембраны хламидий, а   |
|реагенты других фирм - моноклональные антитела к           |
|родоспецифическому хламидийному липолисахариду (ЛПС). В    |
|России ЗАО “НИАРМЕДИК плюс” при НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН|
|выпускает моноклональные антитела к ЛПС хламидий, которые  |
|успешно конкурируют с продукцией иностранных фирм по       |
|качеству продукции. Это набор “Хламоноскрин” для           |
|определения моноклональных антител к родоспецифическому    |
|липополисахаридному антигену и набор “Хламоноскрин-2” для  |
|определения моноклональных антител к видоспецифическому    |
|белковому антигену хламидий трахоматис. Наборы имеют ФС    |
|42-359598 и регистрационное удостоверение Минздрава России |
|93/ 270/ 9 .                                               |
|Моноклональные антитела отличаются друг от друга по        |
|вызываемой яркости свечения, постоянству выявляемых форм ЭТ|
|и степени специфичности. Для диагностики хламидий этим     |
|методом необходим люминесцентный микроскоп.                |
|В целом, метод ПИФ отвечает критериям высокой              |
|чувствительности и специфичности, но требует исполнения    |
|опытным, компетентным лабораторным работником.             |
|Высококвалифицированная экспертная оценка методом ПИФ редко|
|бывает доступной, поэтому средняя чувствительность его     |
|снижается. Метод недостаточно чувствителен и для           |
|стабильного определения малых количеств ЭТ. К тому же      |
|невозможно проверить и отрицательные результаты, и,        |
|следовательно, обнаружить среди них ложноотрицательные, что|

Разместил: Гость Прочитано: 4301